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发表于 2016-8-19 14:14:09
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根据破伤风的典型临床表现即可作出诊断,故一般不做细菌学检查.若临床必须要求做细菌学检查,可按下列方法进行。
l.直接涂片从病灶处取脓汁或坏死组织,直接涂片革兰染色,镜检观察菌体见一端有圆形芽胞呈鼓槌状典型形态的革兰阳性杆菌,可初步报告结果。
2.厌氧培养本菌较易分离,将可疑的材料接种庖肉培养基,在75~85℃水浴加热30分钟,杀灭其他杂菌,而芽胞得以存活,35~37℃培养2~4天。如检材为刨伤组织,应先将组织剪碎,再行接种。在庖肉培养基中生长后可转种适宜的培养基,如新鲜或预热的血平板,培养基中加硫酸新霉素可抑制其他厌氧菌的生长。接种平板后,尽快厌氧培养,18~24小时后,如有此菌,则呈薄膜状迁徙生长。
3.毒力试验以培养滤液给小白鼠做毒力试验和保护力试验,可确定毒素的有无及其性质。做毒力试验,可在小白鼠尾根部皮下或肌内注射0.1~0.25ml培养滤液,阳性者,于注射后12~24h,出现尾部僵直竖起、后腿强直或全身肌肉痉挛等症状,甚至死亡;保护力试验作为上述毒力试验的对照,方法是将0.5ml培养滤液混以1:10稀释的等量破伤风抗毒素,给另一小白鼠注射,如不发病,表示保护力试验阳性,证明培养滤液中有破伤风毒素存在。
4.鉴定一般取伤口分泌物涂片镜检,其典型鼓槌状菌体有鉴定意义。必要时进行细菌分离培养,并用动物保护试验作最后鉴定。有条件时,可用气液相色谱检测其主要代谢产物(A、P、B)协助早期快速诊断.
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