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这几天,在血培养中发现一株奴卡菌。奴卡菌容易被3%盐酸脱色,需要用弱抗酸染色方法才显示抗酸阳性。
我查了一下弱抗酸染色---改良kinyoun染色,希望对各位实验室同行有用。
改良Kinyoun染色
试剂
1. 无水甲醇
2. 50%乙醇
1)50ml 蒸馏水中加入50ml无水乙醇
2)室温保存1年
3. Kinyoun 石炭酸复红
4. 1%硫酸
1) 99ml 蒸馏水中加入1ml浓硫酸
2) 室温保存1年
5. 亚甲基兰
操作步骤
1. 将1-2滴标本涂于玻片上,自然风干。标本不要涂得太厚,(在标本干燥前,可以透过湿的玻片看见玻片下的字);
2. 无水甲醇固定1min;
3. Kinyoun 石炭酸复红充满玻片,染色5min;
4. 以50%乙醇短暂冲洗玻片,约3-5s;
5. 然后用蒸馏水彻底冲洗玻片;
6. 1%硫酸脱色2min,或脱色至玻片上颜色刚刚脱去;
7. 用蒸馏水彻底冲洗玻片,吸去多余水分;
8. 亚甲基兰或孔雀绿复染1min;
9. 然后用蒸馏水彻底冲洗玻片;风干。
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