晓平说消毒：医疗机构环境表面微生物学监测之四：现场采样注意事项

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专家：倪晓平

专栏编辑：丁韧


医疗机构环境表面微生物学检测技术之四：
现场采样注意事项




前几期的讲座主要介绍有关医疗机构环境表面采样的采样概述和准备工作。一旦实施环境表面采样时，必须明确本次去现场采样的目的，因为，不同的采样目的（即消毒质量的考核与感染来源的调查），其采样方法、携带的采样工具、试剂是完全不同的。


本期倪教授为大家介绍的就是医疗机构环境表面现场采样的注意事项，这也是咱们感控同仁们在采样工作中最应该知晓的核心内容之一哦！




一、消毒质量的考核
1、环境物体表面标本采集方法：
严格执行《医院消毒卫生标准》GB 15982-2012，附录A.3.3 采样方法：用5cm×5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1～4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10mL采样液的试管中送检。


门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样，若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含有相应中和剂。被采表面＜100 cm2，取全部表面；被采表面≥100 cm2，取100 cm2。


2、医务人员手标本采集方法：
严格执行《医院消毒卫生标准》GB 15982-2012，附录A.4.2 采样方法：将浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子1支在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10mL采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm2）计算。若采样时手上有消毒剂残留，采样液应含有中和剂。


二、污染来源的调查
1、为了提高环境表面微生物的检出率，可以不按上述国家规定的方法进行采样，采用工具可以选择更易检出细菌的方法，如采用海绵棒采样，也可采用平皿接触法、薄膜粘贴法，以及现场接种平皿等方法。


含有广谱中和剂的海绵棒
2、可以选择标本的增菌（选择性增菌的方法更佳）的方法，更好地检出目标细菌。采样时应尽量扩大面积，可以不考虑单位的采样面积（如需要反映环境表面的污染程度，则需要记录采样的面积）。
3、采样时不需要考虑消毒前后问题，但有两个问题必须考虑，即环境采用何种消毒剂（为中和剂选择提供信息），以及消毒实施的时间（分析检测结果是否受到消毒措施的影响），为环境检测结果的判断和流行病学分析提供更多的信息。


三、采样时间
（遵循《医院消毒卫生标准》GB 15982-2012）
1、环境物体表面，潜在污染区、污染区消毒后采样。清洁区根据现场情况确定。
2、医务人员手，采取手卫生后，在接触病人或从事医疗活动前采样。


四、卫生标准
（遵循《医院消毒卫生标准》GB 15982-2012）
1、环境物体表面：Ⅰ、Ⅱ类环境，≤5.0 CFU/cm2；Ⅲ、Ⅳ类环境，≤10.0 CFU/cm2。
2、医务人员手：卫生手消毒后的菌落总数应≤10.0 CFU/cm2；外科手消毒后的菌落总数应≤5.0 CFU/cm2。
3、按《消毒技术规范（2002版）》考核方法，消毒前后两次环境表面的采样结果比较，自然污染菌清除率≥90%，或人工污染菌清除率≥99%，均为合格。


五、注意事项
1、自备采样物品清单 携带采用工具、运送工具、记录表、手卫生和个人防护用品等。最好各单位有各自不同采样目的的现场采样准备清单一览表，出发前进行一一核对，以免遗漏。
2、人员分工明确 尤其是采样人员。最好事先有过人员比对的实验，确定采样的人员不要频繁更换，起码本年度内不要更换。因为不同的采样人员，其采样时的手势、压力、速度以及棉拭子头与环境表面的接触面等因素均会影响表面污染细菌的捕获率。


棉拭子头与表面的有效接触
3、防止二次污染 采样人员在采样前应做好手卫生、戴口罩、帽子。非采样人员应远离采样区，以避免讲话等行为污染采样区。同时，采样人员的熟练采样过程，防止手污染样品的事件发生。采用规格板采样时，应从离采样者最近的哪块规格板开始采样，以避免手臂抖动时对采样区的污染。标本送检过程中应采用采样箱（运送箱）保存，避免环境污染。




带有温度控制的采样箱
4、标本尽快送检 用于考核消毒质量的样品应尽量在2h内送达，并要求微生物实验室在接到标本后2h内完成实验；如因特殊情况无法及时完成，应冷藏保存。考核用标本不得增菌，不然无法反映实际的消毒效果。
5、阴性对照不可省 采样开始，或结束时，应采集一份采用工具（采样棉拭子、含有采样液的试管）作为阴性对照送检；一旦阴性对照出现阳性结果，有细菌生长，本次采样应重新实施；同时应查找污染的原因，防止类似事件再次发生。
6、物体面积应固定 不足100 cm2的物体表面，采样面积可以自行估算，但一旦确定了该物体的表面面积，就应固定下来，并在以后的采样中参照执行，不得轻易更改，以免影响结果的判定。



下期预告：微生物室试验注意事项
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图文编辑：小小牧童